目前针对灵芝孢子的破壁技术有生物酶解法、化学法及物理法，较为广泛使用的是物理法。常见的几种破壁技术包括高速振动破壁法、超音速气流破壁法、高压蒸汽破壁法及本文介绍的微波低温破壁法。 

（一）微波低温破壁法的操作流程 

    微波低温破壁法的处理方式步骤简单，易行。主要分为两个步骤：一是对灵芝孢子粉的微波处理，使用日常所见的微波炉将灵芝孢子粉在温度70～99℃中处理0.5～4.5小时；二是将经过微波处理后的灵芝孢子粉加入到特制的振动磨中，并充入保护性气体进行低温振动粉碎操作，流程控制时间在10～30min，温度为-9℃至-16℃之间。此处的保护气体可选择氮气、氩气及二氧化碳，所选取的振动频率为1000-1200Hz，振幅为9～12cm，三次所选气体的试验结果显示灵芝孢子粉的破壁率达到99%以上。 

（二） 微波低温破壁法的评价 

    由于在整个操作过程中使用的是惰性气体，对于环境的污染为零，同时破壁率高，铬金属的含量为零，对于孢子粉内的营养成分的程度高，确保了有效性。 
二、超临界CO2萃取技术 

（一）超临界CO2萃取破壁法的操作流程 

    超临界CO2萃取破壁法属于用现代化技术提取灵芝孢子中的天然活性成分，这个新工艺不仅仅用于灵芝孢子的萃取中，也适用于其他的中药材的萃取如冬凌草的提纯分离中，由此可见，该技术还是具有巨大的发展潜力的。 

    该方法的具体步骤是先经过预处理得到灵芝的子实体、灵芝孢子粉等，而所选的原料要求是无杂质、干燥且清洁的，而后将原料进行粉碎，选取粒度为20～60目间的，最佳粒度为40目左右。粉碎步骤的目的在于提高CO2萃取的效果，而后在分离釜压力为5～30Mpa，萃取釜为15～50Mpa这样的同一流程前者压力大于后者的情况下，选取15～25小时每升的二氧化碳流量，并设计萃取釜的有效温度为30～80℃，最佳温度为50～60℃之间。灵芝中的有效成分如灵芝油、灵芝三萜、灵芝核苷等都可以在特定的压力和温度下，在超临界状态时有较高的溶解度，从而使之萃取出来。同时需要注意的是在第一次萃取时主要是得到以某一成分为主的混合物，而不会是很纯净的某单一成分，但是在经过离子交换、分子蒸馏后就可以提高单一成分的纯度，从而得到我们所需的药物。 

（二） 超临界CO2萃取法的评价 

    由于整体操作全程是低温惰性的环境，不会过多影响灵芝孢子内的营养成分，同时安全，少污染，也不含有重金属铬，但是劣势是萃取步骤较多，而且在萃取过程还需要乙醇作为夹带剂，压强，温度及夹带剂的不同都会影响提取物的成分，条件要求较严苛，从而带来的是成本也相对较高，暂未能广泛应用。 

    采集灵芝孢子粉，弃去其中的大杂质并进行干燥处理，再用200～400目筛进行过筛处理，经过物理法技术进行破壁处理，破壁率能达99%以上，对破壁后的灵芝孢子粉进行提取。加入6至10倍的介于40%～95%的乙醇，首次是在50～80℃中提取2-3h时间，再用100-120目筛进行过筛处理，在首次提取后的滤液中第二次加入6至10倍的介于40%～95%的乙醇，第二次仍在50～80℃中提取2～3h时间，再用100～120目筛进行过筛处理，收取二次过滤的滤液再重复操作一次。将三次过滤的滤液相加合并，用200～400目筛最后一次过筛处理，并用50～70℃的处理将密度浓缩至1.15～1.25L，最后得出的滤液进行干燥处理得到最终的灵芝孢子粉提取物。 

    目前破壁及后续的提取操作仍是灵芝深加工的重点。破壁法中还有其他物理法尚未进行介绍，例如高速振动法，这是通过振动棒在高速振动的条件对孢子粉进行敲碎，但在过程中容易带入重金属离子，铬含量较高，因而该方法操作易行，但后续将铬金属分离出来的问题也亟需解决。另一种工艺是常温破壁外释技术，主要是采用超音速气流的破壁方法，将灵芝孢子置于高音速气流中，该方法虽然破壁率极高，但是在过程中容易使灵芝孢子里的有效活性和营养成分流失。还有一种工艺是高压蒸汽方法，即将灵芝孢子放置于高压容器罐中进行密封操作，同时充入适量的CO2和高压蒸汽，并进行快速泄压，利用CO2的快速爆破使灵芝孢子外壁破裂，由于靶向性弱，这种工艺的破壁率不高，而且流程繁琐。本文选取的破壁提取操作都属于目前具有一定前景的工艺，也希望在今后能出现更多新的工艺，不断突破现有的技术瓶颈。 （工作单位：贺州市农业科学实验室）